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1,8-桉叶素 抗传染性支气管炎病毒作用效果及机理研究进展

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1,8-桉叶素是桉树精油的主要成分,其具有抗菌、消炎、驱虫等作用。目前广泛应用于医药、食品、日化等领域。在医药领域主要应用于治疗流感、感冒、细菌性痢疾、肠炎和各种感染(包括腮腺炎、流脑、化脓性扁桃炎、小儿头疮、丹毒、外伤感染)等。目前在抗菌、消炎以及驱虫等方面作用机理研究较多,对抗病毒方面的作用研究还不是很多。


鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种高度接触性传染病。IBV感染鸡主要以呼吸道、肾脏和生殖系统等部位的病理变化为特征。IB在全世界范围普遍流行,造成很大的经济损失,是危害家禽养殖业最严重的疾病之一。IBV目前主要使用弱毒疫苗或灭活疫苗预防,但是由于IBV血清型多,不同血清型之间缺乏有效交叉保护,新的变异毒株不断出现,给本病的诊断和防治带来的很大的挑战。
IBV属于冠状病毒科,结构呈球形,是单股正链含包膜的RNA病毒。基因组由结构蛋白和非结构蛋白组成。IBV的结构蛋白分别由纤突蛋白(spike,S)、膜蛋白(Membrane,M)、小包膜蛋白(Smallenvelope,E)和核蛋白(Nucleocapsid,N)组成,结构蛋白在病毒吸附、复制和转录过程发挥作用。IBV的非结构蛋白为PP1a和PP1b两个多聚蛋白,在体内这两个多聚蛋白由IBV编码的蛋白酶裂解为16个功能蛋白nsp1-16,这些非结构蛋白功能的改变会影响IBV的进化。


图1 IBV病毒结构
1,8-桉叶素在抗IBV方面的研究,吴楠等(2008)从细胞和分子水平研究了1,8-桉叶素抗IBV的作用效果机制,结果表明:1,8-桉叶素有抑制IBV作用,主要体现在直接灭活作用,在IBV吸附和复制阶段也有一定作用,另外其作用机制是1,8-桉叶素与N蛋白的受体结合部位有较强的作用力,可抑制病毒的复制和组装。
Zhiwei Yang等(2010)也证明1,8桉叶素的抗IBV活性主要作用机制,1,8-桉叶素的结合位点位于磷酸化核衣壳(N)蛋白的N末端,并且通过MTT分析表明,1,8-桉叶素对IBV的抑制作用在进入细胞之前适度发生,而在病毒渗透进入细胞后则明显强烈。其还对比了利巴韦林抗IBV的作用效果。
结果表明:1,8-桉叶素的CC50(50%细胞毒性浓度)高于10mM,而利巴韦林CC50为1mM。1,8-桉叶素的最大TD0(非细胞毒性浓度)被确定为3.90±0.22mM,远高于利巴韦林(0.78±0.15mM)。1,8-桉叶素可以抑制IBV其IC50(50%病毒抑制浓度)为0.61mM。

  
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